تُعدّ تقنية الإليزا (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay – ELISA) من أكثر التقنيات المناعية استخدامًا في المختبرات الطبية والبحثية، لما تتميز به من دقة عالية، وحساسية ممتازة، وسهولة في التطبيق. وتعتمد هذه التقنية على التفاعل النوعي بين المستضد (Antigen) والضد (Antibody) للكشف الكمي أو النوعي عن الجزيئات الحيوية في العينات البيولوجية.
المبدأ الأساسي لتقنية الإليزا
تعتمد تقنية ELISA على ربط أحد مكونات التفاعل المناعي (مستضد أو ضد) بإنزيم، وعند إضافة المادة الأساس (Substrate) الخاصة بالإنزيم يحدث تفاعل لوني يمكن قياس شدته باستخدام جهاز قارئ الصفائح (ELISA Reader).
وتتناسب شدة اللون المتكوّن طرديًا مع تركيز المادة المراد قياسها في العينة.
أنواع تقنية الإليزا
1. الإليزا المباشرة (Direct ELISA)
يُستخدم فيها ضد واحد مرتبط بإنزيم للكشف عن المستضد مباشرةً، وتتميز بالسرعة وقلة الخطوات، لكنها أقل حساسية.
2. الإليزا غير المباشرة (Indirect ELISA)
تُستخدم للكشف عن الأجسام المضادة في العينة، وتعتمد على ضد أولي غير مرتبط بإنزيم وضد ثانوي مرتبط بإنزيم، مما يزيد الحساسية.
3. الإليزا الساندويتش (Sandwich ELISA)
تُعد من أكثر الأنواع دقة، حيث يُحتجز المستضد بين ضدين (Capture وDetection antibody)، وتُستخدم لقياس البروتينات والسيتوكينات والهرمونات.
4. الإليزا التنافسية (Competitive ELISA)
تعتمد على التنافس بين مستضد العينة ومستضد موسوم، وتُستخدم غالبًا لقياس الجزيئات الصغيرة مثل الهرمونات والأدوية.
خطوات إجراء اختبار الإليزا
تثبيت المستضد أو الضد على سطح الصفيحة البلاستيكية
إضافة العينة المحتوية على المادة المراد قياسها
إضافة الضد المرتبط بالإنزيم
غسل الصفائح لإزالة الارتباطات غير النوعية
إضافة المادة الأساس (Substrate)
قياس التفاعل اللوني باستخدام قارئ ELISA
التطبيقات الحيوية والطبية لتقنية الإليزا
تُستخدم تقنية ELISA على نطاق واسع في:
تشخيص الأمراض المعدية (مثل HIV، HBV، HCV)
قياس الهرمونات (الإنسولين، TSH، الكورتيزول)
تقييم السيتوكينات وعوامل الالتهاب
تشخيص أمراض المناعة الذاتية
البحوث الجزيئية والسريرية
مزايا تقنية الإليزا
حساسية ونوعية عالية
إمكانية التحليل الكمي
مناسبة للفحوصات الروتينية والبحثية
إمكانية تحليل عدد كبير من العينات في وقت واحد
محددات التقنية
الحاجة إلى معايرة دقيقة
احتمال حدوث نتائج إيجابية كاذبة في حال ضعف الغسل
تأثر النتائج بجودة الأجسام المضادة المستخدمة
الخلاصة
تمثل تقنية الإليزا حجر الأساس في الفحوصات المناعية الحديثة، وأسهمت بشكل كبير في تطور التشخيص الطبي والبحث العلمي. إن الفهم الجيد لمبدأ هذه التقنية وأنواعها وتطبيقاتها يُعدّ ضرورة لطلبة الكيمياء الحياتية والعلوم الطبية، لما لها من دور محوري في التحاليل السريرية والدراسات البحثية.
جامعة المستقبل الأولى على الجامعات العراقية الأهلية